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如何避免PCR實(shí)驗室出現污染，有哪些辦法
發(fā)布時(shí)間： 2021-11-01 點(diǎn)擊次數： 856次PCR實(shí)驗室又叫基因擴增實(shí)驗室，由于PCR檢測因其高靈敏度、快速、操作方便等優(yōu)勢已經(jīng)被廣泛應用，不過(guò)正是由于它靈敏度*，極微量的污染源都有可能導致檢測結果的假陽(yáng)性，因此，如何避免以及處理實(shí)驗室污染，對PCR人來(lái)說(shuō)是一門(mén)必修課。一、樣本間交叉污染：主要是在采（?。拥倪^(guò)程中，由于取樣工具之間的交叉造成污染；或者在核酸提取的過(guò)程中，由于移液器、離心管等使用不當導致的污染。二、PCR試劑的污染：主要是在PCR試劑配制過(guò)程中，由于移液器、容器、陰性對照及其它試劑被核酸模板或陽(yáng)性對照污染。三、克隆質(zhì)粒的污染：在PCR實(shí)驗室操作中經(jīng)常會(huì )用到陽(yáng)性參考品，這些陽(yáng)性參考品大多數是由某些克隆質(zhì)粒制作而成，克隆質(zhì)粒在單位容積內濃度高，不小心使用很容易造成污染。四、PCR擴增產(chǎn)物污染這是PCR反應中主要常見(jiàn)的污染問(wèn)題。因為PCR產(chǎn)物拷貝量大，遠遠高于PCR檢測數個(gè)拷貝的極限，所以極微量的PCR產(chǎn)物污染，就可造成假陽(yáng)性結果。還有一種容易忽視，可能造成PCR產(chǎn)物污染的形式是氣溶膠污染，在空氣與液體面摩擦時(shí)就可形成氣溶膠，據計算一個(gè)氣溶膠顆?？珊?.8萬(wàn)拷貝，因而由其造成的污染是一個(gè)值得特別重視的問(wèn)題。污染消除判斷標準：設計陰性對照組，根據陰性對照確認污染情況?？墒褂贸ㄩ_(kāi)后隔夜放置操作區的陰性對照進(jìn)行實(shí)驗（在單獨的PCR實(shí)驗室驗證），若連續三天陰性對照沒(méi)有起跳，則說(shuō)明污染得到控制，可恢復正常實(shí)驗。- 下一篇：食品實(shí)驗室房間布局設置
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